पीसीआर विश्लेषण क्या है?
पॉलिमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) विश्लेषण एक प्रयोगशाला तकनीक है जिसे नमूना में डीएनए की छोटी मात्रा को एम्पलीफिकेशन के नाम से जाना जाता है । पीसीआर एम्पलीफिकेशन के दौरान, ब्याज के डीएनए को बार-बार कॉपी किया जाता है जब तक कि विश्लेषण और पहचान के लिए पर्याप्त न हो। उदाहरण के लिए, पीसीआर का उपयोग जीवों से छोटी मात्रा में डीएनए की पहचान के लिए किया जा सकता है जो मूत्र नमूने में मौजूद गोनोरिया या क्लैमिडिया का कारण बनता है।
पीसीआर कैसे काम करता है?
पीसीआर में पहला कदम नमूना को गर्म करना है ताकि डबल स्ट्रैंडेड डीएनए दो सिंगल स्ट्रैंड्स में अलग हो - इसे denaturation कहा जाता है । फिर प्राइमर्स , डीएनए के छोटे नमूने जो ब्याज के डीएनए अनुक्रम के सिरों तक मेल खाते हैं, नमूना डीएनए के साथ संयुक्त होते हैं। इसके बाद, प्राइमर स्थान पर डीएनए प्रतिकृति शुरू करने के लिए एक डीएनए पोलीमरेज़ का उपयोग किया जाता है। अंत में, डीएनए को एक बार फिर तारों को अलग करने के लिए गरम किया जाता है, और पूरी पीसीआर प्रक्रिया फिर से शुरू होती है।
नमूना में उपस्थित ब्याज के डीएनए सेगमेंट की मात्रा प्रत्येक पीसीआर चक्र के साथ तेजी से बढ़ जाती है: एक प्रति दो हो जाती है, फिर चार हो जाती है, फिर आठ हो जाती है; इसलिए आम तौर पर, यह निर्धारित करने के लिए केवल 20 से 40 चक्रों की आवश्यकता होती है कि प्रश्न में डीएनए मौजूद है (और, यदि यह है, तो विश्लेषण के लिए पर्याप्त नमूना प्रदान करना है)।
एक बहुलक श्रृंखला प्रतिक्रिया के सभी कदम - डीएनए को दर्शाते हुए, प्राइमर्स को लागू करते हुए, और डीएनए को बढ़ाते हुए - विभिन्न तापमान पर होते हैं, इसलिए शुरुआती मिश्रण एक साथ रखा जाता है, चरणों को थर्मोक्साइक्लिंग नामक प्रक्रिया के माध्यम से नियंत्रित किया जा सकता है, जिसमें प्रत्येक चरण के लिए पर्याप्त लंबे समय तक तापमान आवश्यक स्तर पर होता है।
इस प्रकार, पीसीआर मानव हस्तक्षेप की थोड़ी सी आवश्यकता के साथ एक एकल परीक्षण ट्यूब में लक्ष्य डीएनए की मात्रा को बढ़ाने का एक प्रभावी तरीका है।
पॉलिमरस चेन प्रतिक्रिया ने जैविक तकनीक में एक क्रांति का प्रतिनिधित्व किया जब इसे पहली बार 1 9 80 के दशक में विकसित किया गया था, और पीसीआर के निर्माता, कारी मुलिस ने 1 99 3 में अपने काम के लिए रसायन विज्ञान में नोबेल पुरस्कार जीता था।
पीसीआर एसटीडी परीक्षण के लिए प्रासंगिक क्यों है?
पॉलिमरेज़ चेन रिएक्शन, और लिगेज चेन रिएक्शन जैसी संबंधित तकनीकें एसटीडी परीक्षण के लिए बढ़ते महत्व के साबित हो रही हैं। ऐसा इसलिए है क्योंकि ये तकनीक सीधे नमूने में वायरल डीएनए या आरएनए की थोड़ी मात्रा की पहचान कर सकती हैं। रोगजनक के आनुवांशिक कोड की पहचान करने के लिए रोगजनक जीवित होने की आवश्यकता नहीं होती है - जैसे जीवाणु संस्कृति या वायरल संस्कृति । लोगों को एक जासूसी एंटीबॉडी प्रतिक्रिया विकसित करने के लिए पर्याप्त समय पहले संक्रमण होने की आवश्यकता नहीं है (जैसे एलिसा द्वारा पता चला है।) इसका मतलब है कि पीसीआर तकनीक कभी-कभी अन्य परीक्षणों की तुलना में बीमारियों का पता लगा सकती है, और बिना नमूने को जीवित रखने या बिल्कुल सही समय पर परीक्षण करने के बारे में चिंतित होने की आवश्यकता है।