जीनोटाइपिंग और फेनोटाइपिंग एचआईवी ड्रग प्रतिरोध की पहचान कर सकते हैं, और यहां तक कि भविष्यवाणी भी कर सकते हैं
यहां तक कि चिकित्सा के इष्टतम अनुपालन वाले लोगों के लिए भी, वायरस के प्राकृतिक उत्परिवर्तन के कारण समय के साथ एचआईवी दवा प्रतिरोध की कुछ डिग्री विकसित होने की उम्मीद है। अन्य मामलों में, प्रतिरोध तेजी से विकसित हो सकता है जब उपरोक्त अनुपालन प्रतिरोधी एचआईवी आबादी को बढ़ने की अनुमति देता है, जिससे अंततः उपचार विफलता हो जाती है।
जब उपचार विफलता होती है, प्रतिरोधी वायरस की इस नई आबादी को दबाने के लिए वैकल्पिक दवा संयोजनों का चयन किया जाना चाहिए।
आनुवांशिक प्रतिरोध परीक्षण किसी व्यक्ति के "वायरल पूल" में प्रतिरोधी उत्परिवर्तन के प्रकारों की पहचान करके इसे सुविधाजनक बनाने में सहायता करता है, जबकि यह पता लगाना कि उन वायरसों को कितना संवेदनशील एंटीरेट्रोवायरल एजेंट संभव है।
एचआईवी में अनुवांशिक प्रतिरोध परीक्षण के लिए दो प्राथमिक उपकरण का उपयोग किया जाता है: एचआईवी जीनोटाइपिक परख और एचआईवी फेनोटाइपिक परख ।
जीनोटाइप और फेनोोटाइप क्या है?
परिभाषा के अनुसार, एक जीनोटाइप केवल जीव की आनुवांशिक मेकअप है, जबकि एक फेनोटाइप उस जीव की अवलोकन योग्य विशेषताओं या लक्षणों में है।
जीनोटाइपिक assays (या जीनोटाइपिंग) एक सेल के जेनेटिक कोडिंग, या डीएनए के भीतर विरासत निर्देशों की पहचान करके कार्य करता है। फेनोोटाइपिक assays (या phenotyping) विभिन्न पर्यावरण स्थितियों के प्रभाव के तहत उन निर्देशों की अभिव्यक्ति की पुष्टि।
जबकि जीनोटाइप और फेनोटाइप के बीच संबंध पूर्ण नहीं है, जीनोटाइपिंग अक्सर फेनोटाइप की भविष्यवाणी कर सकती है, खासकर जब आनुवंशिक कोड में परिवर्तन लक्षणों या विशेषताओं में अपेक्षित परिवर्तनों को प्रदान करते हैं-जैसे कि दवा प्रतिरोध विकसित करने के मामले में।
दूसरी तरफ फेनोोटाइप, "यहां और अब" की पुष्टि करता है। इसका उद्देश्य पर्यावरणीय दबाव में विशिष्ट परिवर्तनों के लिए जीव की प्रतिक्रिया का आकलन करना है- जैसे कि जब एचआईवी विभिन्न दवाओं और / या दवाओं के सांद्रता के संपर्क में आती है।
एचआईवी जीनोटाइपिंग समझाओ
एचआईवी जीनोटाइप आमतौर पर प्रतिरोध परीक्षण के लिए उपयोग की जाने वाली सबसे आम तकनीक है।
परख का लक्ष्य वायरस के जीनोम (या जेनेटिक कोड) के गैग-पोल क्षेत्र में विशिष्ट अनुवांशिक उत्परिवर्तनों का पता लगाना है। यह वह क्षेत्र है जहां रिवर्स ट्रांसक्रिप्टस, प्रोटीज़ और इंटीग्रेज एंजाइम-अधिकांश एंटीरेट्रोवायरल दवाओं के लक्ष्य-डीएनए श्रृंखला पर एन्कोड किए गए हैं।
पहली बार पॉलिमरस चेन रिएक्शन (पीसीआर) तकनीक का उपयोग करके एचआईवी जीनोम को बढ़ाकर, प्रयोगशाला तकनीशियन विभिन्न उत्परिवर्तन पहचान प्रौद्योगिकियों का उपयोग करके वायरस के जेनेटिक्स अनुक्रम (या "मानचित्र") कर सकते हैं।
थेस उत्परिवर्तन (या उत्परिवर्तनों का संचय) तकनीशियनों द्वारा व्याख्या किया जाता है जो पहचान किए गए उत्परिवर्तनों और वायरस की विभिन्न एंटीरेट्रोवायरल दवाओं के लिए अपेक्षित संवेदनशीलता के बीच संबंधों का विश्लेषण करते हैं। ऑनलाइन डेटाबेस टेस्ट अनुक्रम की तुलना प्रोटोटाइप "जंगली प्रकार" वायरस (यानी, एचआईवी जिसमें कोई प्रतिरोधी उत्परिवर्तन नहीं है) की तुलना करके सहायता कर सकते हैं।
इन परीक्षणों की व्याख्या दवा संवेदनशीलता को निर्धारित करने के लिए प्रयोग की जाती है, जिसमें बड़ी संख्या में महत्वपूर्ण उत्परिवर्तन दवा प्रतिरोध के उच्च स्तर को प्रदान करते हैं।
एचआईवी फेनोयाइटिंग समझाओ
एचआईवी फेनोटाइपिंग दवा की उपस्थिति में व्यक्ति के एचआईवी के विकास का आकलन करती है, फिर एक ही दवा में नियंत्रण, जंगली प्रकार के वायरस की वृद्धि के साथ तुलना करता है।
जीनोटाइपिक assays के साथ, phenotypic परीक्षण एचआईवी जीनोम के गैग-पोल क्षेत्र को बढ़ाते हैं।
जेनेटिक कोड का यह खंड फिर से संयोजक डीएनए तकनीक का उपयोग करके जंगली प्रकार के क्लोन पर "तैयार" होता है । परिणामस्वरूप पुनः संयोजक वायरस का प्रयोग विट्रो (प्रयोगशाला में) में स्तनधारी कोशिकाओं को संक्रमित करने के लिए किया जाता है।
वायरल नमूना तब 50% और 90% वायरल दमन हासिल होने तक विभिन्न एंटीरेट्रोवायरल दवाओं की सांद्रता बढ़ाने के लिए उजागर किया जाता है। तब सांद्रता नियंत्रण, जंगली प्रकार के नमूने के परिणामों की तुलना में की जाती है।
रिश्तेदार "गुना" परिवर्तन मूल्य सीमा प्रदान करते हैं जिसके द्वारा दवा संवेदनशीलता निर्धारित की जाती है। एक चार गुना परिवर्तन का मतलब है कि जंगली प्रकार की तुलना में वायरल दमन को प्राप्त करने के लिए चार गुना दवा की आवश्यकता होती है।
गुना मूल्य जितना अधिक होगा, वायरस कम संवेदनशील होगा एक विशिष्ट दवा के लिए।
इन मानों को तब निचले-नैदानिक और ऊपरी-नैदानिक श्रेणियों के भीतर रखा जाता है, ऊपरी मूल्यों में दवा प्रतिरोध के उच्च स्तर को संदर्भित किया जाता है। ( नमूना रिपोर्ट देखें।)
आनुवंशिक प्रतिरोध परीक्षण कब किया जाता है?
अमेरिका में, आनुवांशिक प्रतिरोध परीक्षण परंपरागत रूप से उपचार के रोगियों पर यह निर्धारित करने के लिए किया जाता है कि क्या उनके पास "अधिग्रहित" दवा प्रतिरोध है या नहीं। यूएस में अध्ययन से पता चलता है कि संक्रमित वायरस का 6% और 16% कम से कम एक एंटीरेट्रोवायरल दवा के प्रतिरोधी होगा, जबकि लगभग 5% दवा के एक से अधिक वर्गों के प्रतिरोधी होंगे।
आनुवांशिक प्रतिरोध परीक्षण का भी प्रयोग किया जाता है जब चिकित्सा प्रतिरोध पर व्यक्तियों में दवा प्रतिरोध पर संदेह होता है। परीक्षण किया जाता है जबकि रोगी असफल नियम लेता है या उपचार बंद होने के चार सप्ताह के भीतर वायरल लोड 500 प्रतियों / एमएल से अधिक होता है। जीनोटाइपिक परीक्षण को आम तौर पर इन उदाहरणों में प्राथमिकता दी जाती है क्योंकि उन्हें कम लागत होती है, तेजी से बदलाव का समय होता है, और जंगली प्रकार और प्रतिरोधी वायरस के मिश्रणों का पता लगाने के लिए अधिक संवेदनशीलता प्रदान करता है।
फनोटाइपिक और जीनोटाइपिक परीक्षण का संयोजन आमतौर पर जटिल, बहु-दवा प्रतिरोध वाले व्यक्तियों के लिए प्राथमिकता दी जाती है, खासतौर पर प्रोटीज़ इनहिबिटर के संपर्क में आने वालों के लिए।
सूत्रों का कहना है:
विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ)। "एचआईवी ड्रग प्रतिरोध तथ्य पत्रक।" जिनेवा, स्विट्जरलैंड; 11 अप्रैल, 2011।
किम, डी .; ज़ीबेल, आर .; सदावाला, एन .; और अन्य। "प्रसारित एचआईवी -1 एआरवी दवा प्रतिरोध से जुड़े उत्परिवर्तन में रुझान: 10 एचआईवी निगरानी क्षेत्रों, यूएस, 2007-2010।" रेट्रोवायरस और अवसरवादी संक्रमण पर 20 वें सम्मेलन। एट्लान्टा, जॉर्जिया; 6 मार्च, 2013; मौखिक सार 14 9।
राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (एनआईएच)। "एचआईवी -1-संक्रमित वयस्कों और किशोरावस्था में एंटीरेट्रोवायरल एजेंटों के उपयोग के लिए दिशानिर्देश।" बेथेस्डा, मैरीलैंड; 11 अक्टूबर, 2013।